INPP5F基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液

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产品信息

品牌 阿拉丁
Cas编号
稳定性和储存 -20℃保存,3个月有效;-80℃保存,至少一年有效。
过滤标签 HEK293T基因敲除细胞RIPA裂解液
储存温度 -80℃储存
运输条件 超低温冰袋运输
描述

INPP5F Knockout HEK293T RIPA Lysate(INPP5F基因敲除HEK293T细胞RIPA裂解液)是通过同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因并实现了目的基因CRISPR敲除的多克隆HEK293T细胞的RIPA裂解液。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。本产品可用于该目的基因敲除后其信号通路相关蛋白的研究,也可以用于该基因相应抗体的验证。本RIPA裂解液源于可同时表达Cas9、目的基因sgRNA和puromycin抗性基因的慢病毒感染HEK293T细胞并经过puromycin筛选后获得的多克隆细胞。制备该细胞的相应慢病毒的基因序列的关键图谱信息请参考图1。图1. 可同时表达sgRNA、Cas9和puromycin抗性的慢病毒其基因序列的关键图谱信息。该细胞中目的基因的敲除已经通过T7EI法的验证。由于本细胞是通过CRISPR/Cas9技术获得的多克隆细胞,基于CRISPR/Cas9技术的特点,理论上平均有2/3的细胞发生移码突变而导致了目的基因的敲除,平均有1/3的细胞并未发生移码突变。很多情况下有约2/3的细胞发生目的基因的敲除,已经足以进行很多的目的基因的生物学功能的研究了。如果希望获得100%基因敲除的细胞,可以自行使用本产品筛选单克隆细胞,或者委托阿拉丁进行单克隆细胞株的筛选服务。本RIPA裂解液用于实验时,建议同时选购无任何靶向的对照细胞RIPA裂解液Control Knockout HEK293T RIPA Lysate 或靶向GFP的对照RIPA裂解液GFP Knockout HEK293T RIPA Lysate 。阿拉丁同时提供基于CRISPR/Cas9技术的INPP5F基因敲除的质粒、慢病毒、HEK293T细胞、HEK293T敲除细胞的RIPA裂解液、HEK293T敲除细胞的Trizol裂解液等产品,具体请在阿拉丁网站查询或在本产品网页点击相应产品。用于制备本产品的RIPA裂解液为阿拉丁生产的P0013B RIPA裂解液(强),其具体组分请查阅产品网页或说明书。INPP5F基因的基本信息如下:


注意事项

阿拉丁拥有sgRNA序列的知识产权,如果需要sgRNA序列,请在订购后发送邮件向info@aladdin-e.com索取。sgRNA序列信息与本产品,未经阿拉丁书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。使用者在发表研究论文或结果时,应注明来源。对于非目录产品的CRISPR基因敲除细胞RIPA裂解液的定制,可联系阿拉丁技术服务service@aladdin-e.com。本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


使用说明

1.细胞RIPA裂解液样品的蛋白浓度测定:推荐使用阿拉丁生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于本产品含有较高浓度的去垢剂,不建议使用Bradford法测定本产品的蛋白浓度。RIPA裂解液的使用说明请参考:https://www.aladdin-e.com。2.细胞RIPA裂解液的使用:本RIPA裂解液测定浓度后加入SDS-PAGE蛋白上样缓冲液即可用于SDS-PAGE、Western检测、以及目的基因抗体的验证等。